Die „Nachtstreife“ ist zurück in Mainz. Die fünfte Staffel begleitet die Mainzer Polizistinnen und Polizisten während ihrer nächtlichen Einsätze in ihrem Kampf gegen Gewalt und Kriminalität. Jede Nacht stehen die Beamtinnen und Beamten der Schutzpolizei, des Kriminaldauerdienstes und der Autobahnpolizei vor neuen Herausforderungen: Rassismus, Gewalt in engen sozialen Beziehungen, Alkoholkonsum, Gewalttaten, Tod, Homophobie.